Pavardė „Ambrolaitis“ yra lietuviška, sudaryta iš dviejų dalių: „Ambro-“ (iš vardo Ambrozius, lotyniškai „nemirtingas“) ir priesagos „-laitis“, nurodančios sūnų arba kilmę. Taigi, ji gali reikšti „Ambroziejaus sūnus“.
Istorijoje žymiausias šios pavardės asmuo – Jonas Ambrolaitis (1903–1976), Lietuvos karinis veikėjas, pulkininkas, aktyvus rezistentas sovietinės okupacijos metais.
Trumpai: kilmė siejama su vardu Ambrozius, o pavardė žinoma dėl pulkininko Jono Ambrolaičio.